| 产品简介：本试剂盒采用酶法破碎酵母细胞壁和碱裂解法裂解酵母细胞来提取酵母质粒DNA。所采用的酵母破壁酶能有效地破坏酵母细胞壁，提高酵母质粒DNA的产量。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。使用本试剂盒提取的酵母质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学实验，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。 注意事项：
1、溶液YP1在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA 全部加入)，混匀，置于2-8℃保存。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在漂洗液中加入无水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的无水乙醇)。3 、使用前请先检查溶液 YP2 和溶液YP3 是否出现混浊，如有混浊现象，可在 37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后再使用。
4 、洗脱缓冲液体积不应少于 50ul ，体积过小影响回收效率；洗脱液的 pH值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其pH 值在8.0 左右(可用NaOH 将水的pH 值调至此范围)，pH 值低于7.0 会降低洗脱效率；DNA产物应保存在-20℃，以防 DNA降解。
5 、质粒得率与酵母菌株、质粒拷贝数、培养条件等因素有关。通常酵母质粒拷贝数都很低，一般通过电泳或分光光度计法都很难检测到，可通过PCR 或转化大肠杆菌来检测。
6 、DNA浓度及纯度检测：得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰， OD260值为1 相当于大约50 μg/ml 双链DNA、40 μ g/ml 单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9 ，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。 |
沪公网安备 31012002003054号
