植物基因组DNA提取试剂盒

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产品参数 产品简介:

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取植物的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,能够高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的植物基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

操作步骤:

使用前先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、植物组织预处理:取新鲜植物组织(不超过100mg)或干重组织(不超过20mg),于液氮中充分研磨至细粉状,让液氮自然挥发。

2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有400ul溶液A、20ul RNase A(10mg/ml)和5ul β-巯基乙醇的离心管中,充分颠倒混匀,室温放置10min。

3、加入140ul溶液B,充分颠倒混匀,12000rpm离心10min,将上清转移至新离心管中(约400-500ul),注意不要吸入沉淀。

4、加入和上清相同体积的溶液C,充分颠倒混匀,再加入和溶液C相同体积的无水乙醇,此时若出现絮状物,将絮状物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm离心5min,弃废液,一次加不完可分两次加入。

注意:如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象,可向吸附柱中加入600ul无水乙醇,并适当延长离心时间。

5、 向吸附柱中加入600ul漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放回收集管。

6、向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中, 12000rpm离心2min。

7、将吸附柱置于室温或50℃温箱放置数分钟,否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR等。

8、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置1-5min,12000rpm离心2min,即可得到高质量的植物基因组DNA。

9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心2min。

注意事项:

1、组织应尽量选取新鲜幼嫩样本,富含多糖多酚的组织可能会提取失败,请选用多糖多酚专用试剂盒。

2、如果试剂盒中的试剂出现沉淀,可在65℃水浴中融化,不影响使用。

3、洗脱缓冲液的体积不能小于50ul,DNA产物应-20℃保存。
性状 试剂盒内容: 50T 100T
RNase A 1ml 1ml×2
β-巯基乙醇 250ul 500ul
溶液A 20ml 40ml
溶液B 7ml 14ml
溶液C 30ml 60ml
漂洗液 15ml 15ml×2
洗脱液 10ml 20ml
吸附柱 50个 100个
收集管 50个 100个
说明书 1份 1份
贮存 室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。
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