组氨酸-琼脂糖凝胶

英文名:
Cas号:
检测信息查询
货号 规格 货期 库存 价格 会员价 订购
1308131403 0 ¥0 请登录
- +
偏远地区如新疆西藏宁夏甘肃等地可能无法运送液体,下单前请联系客服。
别 名
Cas号
M D L
分子式
分子量
产品参数 亲和层析(affinity chromatography)是一种吸附层析,配体(或配基)和相应的配基(或配体)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将配体(或配基)固相化后,就可以使存在液相中的相应配基(或配体)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。亲和层析具有高效、快速、简便等优点
性状 组氨酸-琼脂糖凝胶FF是一种将组氨酸键合在琼脂糖微球上形成的亲和层析分离介质。该产品保留了天然多糖化合物极好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有高动态吸附容量,快流速操作等特点,适用于抗体等富含共轭氨基酸残基的蛋白质、多肽的分离纯化。
1. 装柱
  1.1 根据分离目标性质配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。
  1.2 将所取凝胶抽干,用初始缓冲液(按凝胶∶缓冲液=3∶1的比例)配成匀浆并脱气。
  1.3 将层析柱垂直固定,底端用水或缓冲液润湿并保持一段液位。
  1.4 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,使凝胶在柱内自由沉降,水封层析柱,沉降过夜。
  1.5 连结好柱子顶端活动柱头,打开蠕动泵,让缓冲液用使用时操作流速流过5柱体积,再使用1.5倍的操作流速流过5柱体积,调节适配柱头,使其尽量贴近胶面,最后用2-3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
  注意:所有操作过程不能引入气泡,保证装胶的均匀度。
  2. 平衡
  将平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱,观察检测器的变化,直到电导、pH等参数不变。平衡缓冲液可选择中性pH的Tris-盐酸、PBS、柠檬酸-柠檬酸钠、巴比妥、醋酸-醋酸钠等缓冲液。
  3. 上样
  切换转换阀进行上样,上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可进行线性实验找到最佳上样量;样品的预处理:用平衡液配制,0.45mm微孔滤膜过滤。
  4. 冲洗
  用2-3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱,观察检测器的变化,直到电导、pH等参数不变,此时未吸附的组分被清洗出去。
  5. 洗脱
  组氨酸-琼脂糖凝胶FF的洗脱可用恒定洗脱、梯度洗脱或者阶跃洗脱,一般推荐增大盐浓度的梯度洗脱进行。
  6. 再生
  用平衡缓冲液按操作流速冲洗3-5个柱体积。
  若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
  7. 在位清洗(CIP)
  含1mol/LNaCl的平衡缓冲液洗2个柱体积,0.1%TritonX-100洗2个柱体积,平衡缓冲液洗2个柱体积。
  在位清洗可有效去除介质上的杂质,同时介质上的热源也可基本去除。
贮存 1. 包装:聚胺酯瓶密封包装,规格为25毫升、100毫升、250毫升和1升。   2. 贮存:20%乙醇,4°C冰箱保存。   3. 运输:4°C、常压、避光。   4. 保质期:5-10年。
本网站销售的所有产品仅用于工业应用或者科学研究等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或者治疗,非药用,非食用。
X
QQ